我們所說(shuō)的微生物學(xué)實(shí)驗室是生物學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)基本實(shí)驗室。那么我們對于一個(gè)完備的微生物學(xué)實(shí)驗室，我們都有哪些注意事項呢?
微生物實(shí)驗室基本儀器及要求
1、超凈工作臺
微生物的培養都是在特定培養基中進(jìn)行無(wú)菌培養，那么無(wú)菌培養必然需要超凈工作臺提供一個(gè)無(wú)菌的工作環(huán)境。超凈工作臺的主要用途是微生物的接種及處理時(shí)的無(wú)菌操作。
2、無(wú)菌室(接種室)或接種箱
要培養微生物，首先就需要接種，而接種必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行。這就需要建造無(wú)菌室或接種箱，為接種創(chuàng )造必要的條件。
無(wú)菌室可以建在實(shí)驗室內，作為實(shí)驗室的一個(gè)小套間。面積為4~5平方米，高2.5米左右。無(wú)菌室外應連接一個(gè)小緩沖間，面積為2平方米左右。緩沖間和無(wú)菌室的門(mén)不要建在同一條直線(xiàn)上，以減少空氣中雜菌進(jìn)入無(wú)菌室。
無(wú)菌室和緩沖間應作到清潔、密閉性好，室內建議要有換氣設備，以便在工作結束后更換室內空氣。兩個(gè)房間中應各安裝1盞30瓦紫外線(xiàn)燈管和照明用的日光燈，無(wú)菌室的紫外線(xiàn)燈應懸吊在工作臺的正上方，距臺面1米，以發(fā)揮大的消毒功能。無(wú)菌室內的工作臺等用具用品，應經(jīng)常保持清潔，避免雜菌污染。
如果沒(méi)有條件建造無(wú)菌室，可以用木制的接種箱代替。接種箱結構簡(jiǎn)單，容易制作，其正面安裝玻璃，便于觀(guān)察。箱前方開(kāi)兩個(gè)圓洞各接連1只套袖，操作時(shí)將兩臂從套袖伸入箱內進(jìn)行操作。箱內也應懸吊一盞紫外線(xiàn)殺菌燈和一盞日光燈。
3、培養箱
培養箱有很多種類(lèi)型，它的用途在于為微生物提供一個(gè)適宜的生長(cháng)環(huán)境。主要類(lèi)型包括生化培養箱，霉菌培養箱，厭氧培養箱等。它們的區別主要在于：
a.生化培養箱只能控制溫度。這類(lèi)培養箱可作為一般細菌的平板培養。
b.霉菌培養箱可以控制濕度和溫度。它主要用在霉菌的培養。
c.CO2培養箱適用于厭氧微生物的培養，例如，雙歧桿菌。
4、天平
它是用于準確稱(chēng)量各類(lèi)試劑。實(shí)驗室常用的是電子天平，電子天平按照精度不同又有不同的級別。
5、微生物均質(zhì)器
它的作用在于從固體樣品中提取細菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測樣本具有樣品無(wú)損傷、無(wú)污染、不升溫、不需要洗刷器皿，不需滅菌處理等特點(diǎn)，是微生物實(shí)驗中使用較為方便的儀器。
6、菌落計數器
菌落計數儀可幫助操作者計數菌落數量。通過(guò)放大、拍照、計數等方式準確獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可直接連接電腦來(lái)完成自動(dòng)計數的操作，方便快捷的計數。
7、微波爐/電爐
它主要用于溶液的快速加熱，微生物固體培養基的加熱熔化。
8、高壓滅菌鍋
微生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗物品、培養基、試劑都應嚴格通過(guò)消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號，有些是手動(dòng)的，有些是全自動(dòng)的。用戶(hù)就要根據自己的需要選購。
9、移液器
它是用于精密量取各類(lèi)液體。常見(jiàn)的液體量器有量筒、微量取液器、移液管、刻度試管、燒杯等。
10、冰箱
冰箱是實(shí)驗室中保存試劑和樣品*的儀器。微生物學(xué)實(shí)驗中用到的試劑有些要求是4度保存，有些要求是負20度保存，實(shí)驗人員一定要看清試劑的保存條件，放置在恰當的溫度下保存。具體來(lái)說(shuō)，不同溫度下保存的物品如下：
a.4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。
b.-20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。
c.-80℃適合某些長(cháng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。
11、生物安全柜
微生物實(shí)驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的，對于操作人員來(lái)說(shuō)傷害比較大。為了防止有害的懸浮微粒、氣溶膠的擴散，可以利用生物安全柜對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全的保護作用。
12、搖床
搖床是實(shí)驗室比較常用的一種儀器，在微生物實(shí)驗操作過(guò)程中，液體培養基培養細菌時(shí)需要在特定溫度下振蕩使用。
13、純水裝置
純水裝置包括純水機和蒸餾水器。蒸餾水器的價(jià)格比較便宜，但在造水過(guò)程中需要有人值守；純水機價(jià)格高些，但是使用方便，可以?xún)Υ嬉欢康募兯?。純水的使用也有不同級別，實(shí)驗中配制試劑，配制培養基均都需用純水。
14、生物顯微鏡
由于微生物的體積比較小，所以在觀(guān)察時(shí)需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡主要用于微生物和微小物品結構和形態(tài)等方面的觀(guān)察。
15、冷凍干燥機
主要適用于細菌、微生物、酵母等的干燥作用。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品，在加水以后能夠再次恢復原材料的特性，不影響其生物活性。通過(guò)冷凍干燥，細菌之類(lèi)的材料成為干燥狀態(tài)，從而不會(huì )發(fā)生化學(xué)改變。
16、分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用于測定微生物懸液的濃度，可以正確選取合適的培養時(shí)間。一般是在600nm波長(cháng)測定菌液濃度。
17、恒溫箱
用于恒溫條件下培養微生物。恒溫箱的調溫范圍一般為20～45℃之間。培養酵母菌和霉菌時(shí)，一般可調至28℃，培養細菌和放線(xiàn)菌時(shí)，可根據菌種的生長(cháng)溫度進(jìn)行調溫，一般為30～37℃。
18、電烘箱(干燥箱)
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調溫的范圍一般為40～180℃，對玻璃器皿等物進(jìn)行滅菌時(shí)，可將溫度調至160℃，滅菌4小時(shí)，即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后，在電烘箱溫度還沒(méi)有降到50～70℃以前，不要打開(kāi)電烘箱，以免器皿破裂。
19、恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置，水浴控溫對于樣品來(lái)說(shuō)比較快速且接觸充分。有些微生物反應需要在37度，42度，56度下水浴進(jìn)行，所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
20、酸度計
用于配制試劑時(shí)準確測量pH值，從而保證配制的溶液的準確性。有時(shí)也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。
21、離心機
用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩定，需要低溫環(huán)境，要視樣品的種類(lèi)而定。
離心機洗要求：
在離心機內腔，設置多個(gè)清洗頭或清洗管，離心機可在不開(kāi)蓋或運轉過(guò)程中對離心機內部進(jìn)行清洗。重點(diǎn)有以下幾個(gè)部位：①轉鼓底面及軸承座部位的清洗；②攔液板表面及轉鼓筒體外表面；③轉鼓筒體內表面；④翻蓋內表面及進(jìn)料、刮刀等裝置表面；⑤外殼內表面。
離心機維護規則：
(1)一次規則
當系統出了故障，你可以試探性地改變某些狀態(tài)，一次可以改變一個(gè)參數。做一些簡(jiǎn)單的改變步驟，也許就能解決問(wèn)題。
(2)二次比較規則
在動(dòng)手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在，或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話(huà)說(shuō)，動(dòng)手之前已經(jīng)找對了解決辦法。例如，在進(jìn)樣過(guò)程中發(fā)現內標物的峰值變低了，可以重復進(jìn)樣看看重復性如何，如果是偶然變低，是否是定量管里進(jìn)了氣泡。這個(gè)規則可用于考察系統改變后的情況。更換了流動(dòng)向后在正式進(jìn)樣前可以進(jìn)兩次標準品以檢查保留時(shí)間的穩定情況和色譜峰的穩定性。在梯度洗脫中如果出現了多余的峰，可以空載梯度洗脫一次(真的有問(wèn)題嗎？)，用此規則可以避免不必要的改變，盡快確定糾正措施。
(3)取代規則
用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的好方法。如果你懷疑檢測器引起了噪音，就換一個(gè)性能好的無(wú)轉子硫化儀檢測器。如果故障被排除了，就說(shuō)明換下的檢測器有問(wèn)題。這個(gè)規則應用的規模有大有小，可以從換整個(gè)部件到換印刷線(xiàn)路板上的集成塊。
(4)換回規則
這個(gè)規則和取代規則一起運用，好部件取代了溶體流動(dòng)速率測定儀可疑部件后情況并未得到改善，應重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費用小，也防止了用過(guò)的部件積壓下來(lái)無(wú)轉子硫化儀。這條規則僅適用于單一的故障。換回原則不適用于以下的情況：
?、僭谌∠聲r(shí)新部件已損壞(如泵密封墊圈)；
?、诓考r(jià)格低(如柱內襯過(guò)濾片)；
?、壑匦卵b上原部件要冒損壞的風(fēng)險；
?、芏ㄆ诟鼡Q的部件。
22、液氮罐
液氮罐儲存液氮，可用于細菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長(cháng)期保存。
23、接種針
用于接種和分離微生物。根據不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細電爐絲)制成，長(cháng)約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成，長(cháng)約20厘米。將針頭燒結在針柄上即成。
24、酒精燈
用于接種時(shí)對接種工具進(jìn)行滅菌。酒精燈火焰上部熱度高，應利用這一高溫度區燒灼接種針或試管口。
25、均質(zhì)器
均質(zhì)器使樣品處理過(guò)程中*的設備。常用的均質(zhì)器主要是旋轉均質(zhì)器和拍擊式均質(zhì)器。
旋轉式均質(zhì)器是靠旋轉的刀片將均質(zhì)杯中的樣品打碎。缺點(diǎn)是每次均質(zhì)都要更換刀片和均質(zhì)杯，樣品易受到污染，均質(zhì)過(guò)程中容易產(chǎn)生熱量使樣品中的微生物受損。
拍擊式均質(zhì)器使用無(wú)菌均質(zhì)袋，拍擊的機械裝置作用在均質(zhì)袋上，不和樣品直接接觸，因此不會(huì )受污染。拍擊式均質(zhì)器由于使用方便，不易受污染，使用越來(lái)越廣泛。但其缺點(diǎn)是均質(zhì)的力量不足，對于堅硬的樣品不但無(wú)法均質(zhì)均勻，還會(huì )引起均質(zhì)袋的破損。
使用注意事項：
(1)使用前先將電源插頭固定牢靠后，再打開(kāi)機器開(kāi)關(guān)。插頭不能使其出現松動(dòng)，因為機器工作時(shí)會(huì )產(chǎn)生振動(dòng)導致插頭脫落。這種突然短點(diǎn)對機器會(huì )造成損傷。
(2)均質(zhì)器工作時(shí)不準隨便打開(kāi)均質(zhì)器門(mén)，防止樣液飛濺(有的均質(zhì)器打開(kāi)門(mén)以后自動(dòng)停止拍擊均質(zhì))，一定要先關(guān)機器再開(kāi)門(mén)，然后同樣關(guān)閉門(mén)之后再開(kāi)機。
(3)使用均質(zhì)器之前，一定要檢查均質(zhì)器內是否有異物，防止損傷機械裝置或均質(zhì)袋。
(4)堅硬樣品，盡量不要用拍打式均質(zhì)器，防止均質(zhì)袋破裂，冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)器。當一定要拍打堅硬樣品時(shí)，建議加套均質(zhì)袋。
(5)均質(zhì)器的底部是空的，如遇均質(zhì)袋意外破裂時(shí)，方便清理溢出物。
(6)均質(zhì)器和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處，特別是均質(zhì)袋應避酸堿、避陽(yáng)光，防止其過(guò)早的變脆老化。
(7)均質(zhì)器用完之后，先關(guān)機斷電，然后將其內外清理干凈。
(8)對于一些拍打均質(zhì)后，容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品，建議使用帶過(guò)濾網(wǎng)的無(wú)菌均質(zhì)袋。
26、常用玻璃器皿
?、倥囵B皿(平皿)：用于盛放固體培養基，是培養微生物和觀(guān)察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米?？筛鶕顒?dòng)規模準備若干個(gè)。
?、谠嚬埽河糜谑⒎判泵媾囵B基(固體)，是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長(cháng)220毫米，直徑20毫米；較小的長(cháng)150毫米，直徑15毫米?？筛鶕枰x用其中一種并準備若干個(gè)。
?、坼F形瓶：用于盛放液體培養基。是用液體培養基培養微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升?？筛鶕顒?dòng)需要選擇和準備。
?、芰客?、量杯：用于定量量取各種液體。
?、菀埔汗?吸管)：一般容量為0.5、1、5、10毫升等，可根據需要選擇和準備。
?、奁渌簾?、漏斗等。
注意事項：
以上介紹的是微生物實(shí)驗室的基本儀器配置，在組建實(shí)驗室時(shí)還需要其他一些耗材，例如試管架，無(wú)菌采樣及稱(chēng)樣袋，接種環(huán)，三角瓶，量筒，脫脂棉，紗布，試管筐，玻璃試管，滅菌吸管，涼干架，剪刀，鑷子，過(guò)濾器等。
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